Produkty

Tet 5-metylcytozíndioxygenázy katalyzujú demetyláciu DNA produkciou 5-hydroxymetylcytozínu a ďalších oxidovaných produktov.Tet1 a Tet2 sú vysoko exprimované v myších pluripotentných bunkách a v somatických bunkách sú v rôznom rozsahu downregulované, ale transkripčné mechanizmy sú nejasné.Tu sme definovali domény promótora a zosilňovača v Tet1 a Tet2.V rámci 15-kb "superenhanceru" Tet1 existujú dve miesta začiatku transkripcie (TSS) s rôznymi aktivačnými vzormi počas vývoja.6-kb promótorová oblasť upstream od distálneho TSS je vysoko aktívna v naivných pluripotentných bunkách, autonómne hlási expresiu Tet1 v transgénnom systéme a rýchlo podlieha metylácii a umlčaniu DNA po diferenciácii v kultivovaných bunkách a natívnom epiblaste.Druhý TSS downstream, spojený s konštitutívne slabým promótorom bohatým na CpG, je aktivovaný susedným zosilňovačom v naivných embryonálnych kmeňových bunkách (ESC) a primovaných bunkách podobných epiblastom (EpiLCs).Tet2 má CpG ostrovný promótor s aktivitou nezávislou od pluripotencie a ESC špecifický distálny intragénny zosilňovač;ten druhý je rýchlo downregulovaný v EpiLC.Naša štúdia odhaľuje odlišné spôsoby regulácie transkripcie na Tet1 a Tet2 počas prechodov bunkového stavu v ranom vývoji.Nové transgénne reportéry používajúce cis-regulačné domény Tet1 a Tet2 môžu slúžiť na rozlíšenie nuansovaných zmien v pluripotentných stavoch a základných epigenetických variáciách.