Produkty

Biologická aktivita: BCIP (BCIP p-toluidínová soľ; X-fosfátová p-toluidínová soľ) je chromogénny substrát na kolorimetrickú detekciu aktivity alkalickej fosfatázy.

Shiga toxíny (Stxs) sú produkované enterohemoragickou Escherichia coli (EHEC), ktorá spôsobuje u ľudí infekcie s často smrteľnými následkami.Bunkové línie Vero, odvodené z obličky africkej zelenej opice, predstavujú zlatý štandard na stanovenie cytotoxických účinkov Stxs.Napriek ich globálnemu použitiu sú znalosti o presných štruktúrach glykosfingolipidov receptora Stx (GSL) a ich zostavení v lipidových raftoch slabé.Tu uvádzame komplexnú štrukturálnu analýzu GSL receptora Stx a ich distribúciu na membrány odolné voči detergentom (DRM), ktoré boli pripravené z buniek Vero-B4 a použité ako ekvivalenty lipidových raftov.Identifikovali sme globotriaosylceramid (Gb3Cer) a globotetraozylceramid (Gb4Cer) ako GSL receptory pre podtypy Stx1a, Stx2a a Stx2e pomocou detekcie prekrytia TLC kombinovanej s MS.Menej bežný Stx receptor, globopentaosylceramid (Gb5Cer, Galp3GalNAcp3Galα4Galp4Glcp1Cer), ktorý bol špecificky rozpoznaný (okrem Gb3Cer a Gb4Cer) pomocou Stx2e, bol úplne štrukturálne charakterizovaný.Zistilo sa, že lipoformy GSL receptora Stx obsahujú hlavne ceramidové skupiny zložené zo sfingozínu (d18:1) a C24:0/C24:1 alebo C16:0 mastnej kyseliny.Okrem toho spoločný výskyt s lipidovými raftovými markermi, SM a cholesterolom, v DRM naznačuje asociáciu GSL s membránovými mikrodoménami.Táto štúdia poskytuje základ pre ďalšie skúmanie funkčného vplyvu Stx receptorov spojených s lipidovým raftom na poškodenie buniek Vero-B4 sprostredkované toxínom.