X-GAL CAS:7240-90-6 98% biely až sivobiely kryštalický prášok
| Katalógové číslo | XD90008 |
| Meno Produktu | X-Gal (5-bróm-4-chlór-3-indolyl-beta-D-galaktopyranozid) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Molekulový vzorec | C14H15BrClNO6 |
| Molekulová hmotnosť | 408,63 |
| Podrobnosti o úložisku | -2 až -6 °C |
| Harmonizovaný colný kódex | 29 400 000 |
Špecifikácia produktu
| Vzhľad roztoku | Číry, bezfarebný až svetložltý roztok (50 mg/ml v DMF:MeOH, 1:1) |
| Špecifická optická rotácia | -61,5 +/- 1 |
| Vzhľad | Biely až sivobiely kryštalický prášok |
| Čistota HPLC | min 99 % |
| Rozpustnosť (5 % v DMF) | Rozpustný (5 % w/v, DMF) |
| Voda KF | max 1% |
| Analýza (HPLC na bezvodom základe) | min 98 % hmotn |
Použitie X-gal
X-gal (tiež skrátene BCIG pre 5-bróm-4-chlór-3-indolyl-P-D-galaktopyranozid) je organická zlúčenina pozostávajúca z galaktózy naviazanej na substituovaný indol.Zlúčeninu syntetizoval Jerome Horwitz a jeho spolupracovníci v roku 1964. Formálny chemický názov sa často skracuje na menej presné, ale aj menej ťažkopádne frázy, ako je brómchlórindoxyl galaktozid.X z indoxylu môže byť zdrojom X v X-gal kontrakcii.X-gal sa často používa v molekulárnej biológii na testovanie prítomnosti enzýmu, β-galaktozidázy, v mieste svojho obvyklého cieľa, β-galaktozidu.Používa sa tiež na detekciu aktivity tohto enzýmu v histochémii a bakteriológii.X-gal je jedným z mnohých indoxylglykozidov a esterov, ktoré poskytujú nerozpustné modré zlúčeniny podobné indigovému farbivu v dôsledku enzýmom katalyzovanej hydrolýzy.
X-gal je analóg laktózy, a preto môže byť hydrolyzovaný β-galaktozidázovým enzýmom, ktorý štiepi β-glykozidovú väzbu v D-laktóze.X-gal po štiepení β-galaktozidázou poskytuje galaktózu a 5-bróm-4-chlór-3-hydroxyindol-1. Ten potom spontánne dimerizuje a oxiduje sa na 5,5'-dibróm-4,4'-dichlór -indigo - 2, intenzívne modrý produkt, ktorý je nerozpustný.Samotný X-gal je bezfarebný, takže prítomnosť modro sfarbeného produktu sa preto môže použiť ako test na prítomnosť aktívnej β-galaktozidázy.To tiež umožňuje, aby sa bakteriálna p-galaktozidáza (takzvaná lacZ) použila ako reportér v rôznych aplikáciách.
V dvojhybridnej analýze môže byť p-galaktozidáza použitá ako reportér na identifikáciu proteínov, ktoré navzájom interagujú.Pri tejto metóde môžu byť genómové knižnice skrínované na proteínovú interakciu s použitím kvasinkového alebo bakteriálneho systému.Tam, kde existuje úspešná interakcia medzi proteínmi, ktoré sa skrínujú, povedie to k naviazaniu aktivačnej domény na promótor.Ak je promótor spojený s génom lacZ, produkcia β-galaktozidázy, ktorá vedie k tvorbe modro pigmentovaných kolónií v prítomnosti X-gal, bude preto indikovať úspešnú interakciu medzi proteínmi.Táto technika môže byť obmedzená na skríningové knižnice s veľkosťou menšou ako približne 106. Úspešné štiepenie X-gal tiež vytvára výrazne nepríjemný zápach v dôsledku prchavosti indolu.
Pretože samotný X-gal je bezfarebný, prítomnosť modro sfarbeného produktu sa môže použiť ako test na prítomnosť aktívnej β-galaktozidázy.
Táto jednoduchá identifikácia aktívneho enzýmu umožňuje, aby sa gén pre βgalaktozidázu (gén lacZ) použil ako reportérový gén v rôznych aplikáciách.
