Produkty

PIPES [piperazín-N,N'-bis(2-etánsulfónová kyselina)] sa často používa ako pufrovacie činidlo v biochémii.Je to pufor kyseliny etánsulfónovej vyvinutý Goodom a kol.v 60. rokoch 20. storočia.PIPES má pKa blízko fyziologického pH, čo ho robí užitočným pri práci s bunkovou kultúrou.Bolo zdokumentované, že minimalizuje stratu lipidov pri pufrovaní histológie glutaraldehydu v rastlinných a živočíšnych tkanivách. Tlmiace činidlo s pKa blízko fyziologického pH.

Antimikrobiálny peptid magainín 2 vytvára póry v lipidových membránach a indukuje membránovú permeáciu bunkového obsahu.Hoci je táto permeácia pravdepodobne hlavnou príčinou jeho baktericídnej aktivity, mechanizmus tvorby pórov zostáva nedostatočne pochopený.Preto sme podrobne skúmali interakciu magainínu 2 s lipidovými membránami pomocou jednoduchých obrovských unilamelárnych vezikúl (GUV).Väzba magainínu 2 na lipidovú membránu GUV zvýšila frakčnú zmenu v oblasti membrány, δ, ktorá bola úmerná povrchovej koncentrácii magainínu 2, X. To naznačuje, že rýchlostná konštanta magainínu 2-indukovaných dvoch -prechod stavu z neporušeného stavu do stavu pórov sa značne zvýšil so zvýšením δ.Napätie lipidovej membrány po aspirácii GUV tiež aktivovalo tvorbu pórov indukovanú magainínom 2.Na odhalenie polohy magainínu 2 sa pomocou konfokálnej mikroskopie skúmala interakcia karboxyfluoresceínom (CF)-značeného magainínu 2 (CF-magainín 2) s jednotlivými GUV obsahujúcimi vo vode rozpustnú fluorescenčnú sondu AF647.V neprítomnosti napätia v dôsledku aspirácie sa po interakcii magainínu 2 intenzita fluorescencie GUV ráfika v dôsledku CF-magainínu 2 rýchlo zvýšila na stabilnú hodnotu, ktorá zostala konštantná po dlhú dobu a po 4-32 s pred začiatok úniku AF647 intenzita ráfika začala rýchlo narastať na ďalšiu stabilnú hodnotu.Naopak, v prítomnosti napätia nebolo pozorované žiadne zvýšenie intenzity okraja tesne pred začiatkom úniku.Tieto výsledky naznačujú, že magainín 2 sa nemôže premiestniť z vonkajšej do vnútornej monovrstvy až tesne pred tvorbou pórov.Na základe týchto výsledkov sme dospeli k záveru, že pór indukovaný magainínom 2 je pór aktivovaný natiahnutím a natiahnutie vnútornej monovrstvy je hlavnou hnacou silou tvorby pórov.