ONPG CAS:369-07-3 98,0 % min. biely až vypnutý – biely prášok
| Katalógové číslo | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Meno Produktu | ONPG (2-nitrofenyl-beta-D-galaktopyranozid) |
| Molekulový vzorec | C12H15N08 |
| Molekulová hmotnosť | 301,25 |
| Podrobnosti o úložisku | 2 až 8 °C |
| Harmonizovaný colný kódex | 29 400 000 |
Špecifikácia produktu
| Čistota (HPLC) | Min.98,0 % |
| Vzhľad | Biely až sivobiely prášok |
| Riešenie(1 % vo vode) | Číry, bezfarebný až slabo žltý roztok |
| Obsah vody(Karl Fisher) | Max.0,5 % |
| Špecifická optická rotácia [a]D20(c=1, H2O) | -65,0 °C až -73,0 °C |
Diskusia o ONPG teste (β-galaktozidázový test)
V poslednej dobe sa často objavujú otázky: 1. Prečo možno test ONPG použiť na rozlíšenie oneskorenej fermentácie laktózy?2. Prečo národná norma uvádza, že na test ONPG je potrebné použiť 3% chlorid sodný trisacharid železo (alebo trisacharid železo)?3. Prečo by sa v prípade Vibrio parahaemolyticus pri vykonávaní OPNG testu mal pridávať toluén po kvapkách podľa normy?Aká je funkcia?
Naša spoločnosť skontrolovala množstvo informácií, zhrnula ich a podelila sa s vami nižšie:
Princíp: Čínsky názov ONPG je o-nitrobenzén-β-D-galaktopyranozid.ONPG môže byť hydrolyzovaný na galaktózu a žltý o-nitrofenol (ONP) pomocou β-galaktozidázy, takže aktivitu β-galaktozidázy možno detegovať zmenou farby kultivačného média.
Laktóza je cukor, ktorý väčšina mikroorganizmov potrebuje zistiť.Jeho metabolizmus vyžaduje dva enzýmy, jedným je bunková permeáza, laktóza vstupuje do buniek pôsobením permeázy;druhou je β-galaktozidáza, ktorá hydrolyzuje laktózu na galaktózu.Laktóza a glukóza.β-galaktozidáza môže tiež priamo pôsobiť na ONPG a hydrolyzovať ho na galaktózu a žltý o-nitrofenol (ONP).Dá sa to urobiť za 24 hodín, dokonca aj s fermentormi s oneskorením laktózy.Preto vysvetľuje výsledky pozorovania odberu kultúry 1 zo šikmého agaru a jej naočkovania v celom kruhu pri 36 °C počas 1-3 hodín a 24 hodín.Ak sa vytvorí β-galaktozidáza, zožltne za 1-3 hodiny, ak takýto enzým neexistuje, nezmení farbu do 24 hodín.
Podľa vyššie uvedených dvoch enzýmov možno mikroorganizmy rozdeliť do nasledujúcich kategórií:
1 baktérie fermentujúce laktózu (18-24 hodín) s permeázou a β-galaktozidázou P + G +;
2 Oneskorené fermentory laktózy (trvajúce dlhšie ako 24 hodín), ktorým chýba permeáza, ale obsahujú galaktozidázu: P-G+.
3 Nelaktózové fermentory bez permeázy aj galaktozidázy: P-G-.
Test ONPG možno použiť na rozlíšenie baktérií fermentujúcich laktózu (P-G+) od nefermentujúcich baktérií laktózy (PG-), ako napríklad:
1 Odlíšte neskoré fermentory laktózy (P-G+) od fermentorov bez laktózy (P-G-).
a) Citrobacter (+) a Salmonella arizonae (+) zo Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) zo Shigella sonnei (-).
Prečo bol test ONPG vykonaný pomocou kultivácie cez noc na 3% chloride sodnom, železitom trisacharide (trisacharid železa)?Naša spoločnosť prekonzultovala množstvo informácií, no jednoznačné vyjadrenie neexistuje.Len na webovej stránke FDA je napísané, že "Kultúry, ktoré sa majú testovať, naočkujte na šikmé trojité cukrové železné agary a inkubujte 18 hodín pri 37°C (alebo inej vhodnej teplote, ak je to potrebné). Živné (alebo iné) šikmé agary obsahujúce 1,0 % laktózy sa môže tiež použiť."znamená: testované baktérie boli naočkované na trisacharidové médium železa a kultivované pri 37 °C počas 18 hodín.Živné agarové šikmé (alebo iné) médium obsahujúce 1 % laktózy je tiež prijateľné.Preto sa usudzuje, že trisacharidové médium železa obsahuje laktózu.Po raste cez noc baktérie produkovali dobre aktívnu β-galaktozidázu.Pomocou takýchto baktérií môže byť ONPG rýchlejšie rozložený β-galaktozidázou.Experimentálny jav sa rýchlejšie a lepšie prejavuje.Okrem toho sa po kvapkách pridáva toluén a vodný kúpeľ počas 5 minút, aby sa úplne uvoľnila β-galaktozidáza.
