Produkty

Aktivátory karboanhydrázy: prvá aktivačná štúdia ľudskej sekrečnej izoformy VI s aminokyselinami a amínmi.

Sekrečný izozým ľudskej karboanhydrázy (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, bol klonovaný, exprimovaný a purifikovaný v bakteriálnom expresnom systéme.Kinetické parametre pre hydratačnú reakciu CO(2) preukázali, že hCA VI má ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) a k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (pri pH 7,5 a 20 stupňoch C).hCA VI má významnú katalytickú aktivitu pre fyziologickú reakciu, rádovo rovnakého rozsahu ako všadeprítomná izoforma CA I alebo transmembránový izoenzým CA IX spojený s nádorom.Ukázalo sa, že séria aminokyselín a amínov pôsobí ako aktivátory CA VI s rôznou účinnosťou.l-His, l-Trp a dopamín vykazovali slabé aktivačné účinky CA VI (K(A)s v rozsahu 21-42 mikroM), zatiaľ čo d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonín a niektoré pyridyl-alkylamíny boli lepšími aktivátormi s K(A)s v rozsahu 13-19 mikroM.Najlepšími aktivátormi CA VI boli l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe a histamín s K(A)s v rozsahu 1,23-9,31 mikroM.Všetky tieto aktivátory zosilňujú k(cat), pričom nemajú žiadny vplyv na K(M), zúčastňujú sa teda na kroku určujúcom rýchlosť v katalytickom cykle, reakciách prenosu protónov medzi aktívnym miestom enzýmu a prostredím.