Produkty

CTP:fosfocholíncytidylyltransferáza a (CCTa) je jadrový enzým, ktorý katalyzuje krok obmedzujúci rýchlosť v CDP-cholínovej dráhe pre syntézu fosfatidylcholínu (PC).Lipidová aktivácia CCTα vedie k jeho translokácii do jadrového obalu a expanzii intranukleárnej membránovej siete nazývanej nukleoplazmatické retikulum (NR) mechanizmom zahŕňajúcim deformáciu membrány.Jadrové laminy sú tiež potrebné na stabilitu a proliferáciu NR, ale nie je známe, či je táto jedinečná štruktúra alebo jadrová lamina vo všeobecnosti potrebná na syntézu PC.Na preskúmanie tohto vzťahu bola jadrová vrstva vyčerpaná RNAi alebo narušená expresiou Hutchinson-Gilfordovho syndrómu progérie (HGPS) mutantného laminu A (progerín) a analyzoval sa účinok na metabolizmus CCTa a cholínu.siRNA-sprostredkované umlčanie laminu A/C alebo laminu B1 v CHO bunkách na zníženie NR nemalo žiadny vplyv na syntézu PC, zatiaľ čo dvojitý knockdown nešpecificky inhiboval dráhu.Potvrdením jeho malej úlohy v syntéze PC bolo v NR detegovaných iba 10 % prechodne nadmerne exprimovanej cholín/etanolamín fosfotransferázy.V bunkách CHO bol CCTa nukleoplazmatický a lokalizovaný spolu s GFP-progerínom v jadrových záhyboch a invagináciách;fibroblasty HGPS však vykazovali abnormálnu distribúciu CCTα v cytoplazme a jadrovom obale, ktorá bola sprevádzaná 2-násobným znížením syntézy PC.Napriek jeho zmenenej lokalizácii experimenty so značením cholínom ukázali, že aktivita CCT nebola ovplyvnená a inhibícia syntézy PC bola sledovaná zníženou aktivitou transportéra cholínu citlivého na hemicholínium.Dospeli sme k záveru, že CCTα a laminy špecificky spolupracujú pri vytváraní NR, ale celková štruktúra jadrového obalu má minimálny vplyv na aktivitu CCT a syntézu PC.