Produkty

1. Študovali sme inhibičné účinky izohamnetínu na hubovú tyrozinázu pomocou inhibičnej kinetiky a výpočtovej simulácie.Izorhamnetín reverzibilne inhiboval tyrozinázu zmiešaným spôsobom pri Ki = 0,235 ± 0,013 mM.Merania vnútornej fluorescencie a fluorescencie viažucej 1-anilinonaftalén-8-sulfonát (ANS) ukázali, že izohamnetín neindukoval významné zmeny v terciárnej štruktúre tyrozinázy.Aby sa získal prehľad o procese inaktivácie, kinetika sa vypočítala pomocou meraní v časovom intervale a kontinuálnych reakcií substrátu.Výsledky ukázali, že inaktivácia indukovaná izohamnetínom bola reakciou prvého poriadku s dvojfázovými procesmi.Aby sme získali ďalší prehľad, simulovali sme dokovanie medzi tyrozinázou a izohamnetínom.Simulácia bola úspešná (väzbové energie pre Dock6.3: -32,58 kcal/mol, pre AutoDock4.2: -5,66 kcal/mol a pre Fred2.2: -48,86 kcal/mol), čo naznačuje, že izohamnetín interaguje s niekoľkými zvyškami, napr. ako HIS244 a MET280.Táto stratégia predpovedania interakcie tyrozinázy v kombinácii s kinetikou založenou na flavanónovej zlúčenine sa môže ukázať ako užitočná pri skríningu potenciálnych prirodzených inhibítorov tyrozinázy.

2. Dráha rozkladania kyseliny konalbumínu (CA), monomérneho glykoproteínu z bielka slepačieho vajíčka, bola skúmaná pomocou spektroskopie CD na diaľku a blízkeho UV, emisie vnútornej fluorescencie, vonkajšej fluorescenčnej sondy 1-anilino-8-naftalénsulfonátu (ANS) a dynamický rozptyl svetla (DLS).Pozorujeme zmeny v sekundárnej a terciárnej štruktúre CA závislé od pH.Má prirodzenú α-helikálnu sekundárnu štruktúru pri pH 4,0, ale stratovú štruktúru pri pH 3,0.CA existoval výlučne ako predroztavený globulový stav a roztavený globulový stav v roztoku pri pH 4,0 a pH 3,0.Vplyv pH na konformáciu a termostabilitu CA poukazuje na jej tepelnú odolnosť pri neutrálnom pH.Výsledky DLS ukazujú, že stav MG existoval ako kompaktná forma vo vodných roztokoch s hydrodynamickými polomermi 4,7 nm.Potlačenie tryptofánovej fluorescencie akrylamidom ďalej potvrdilo akumuláciu prechodného stavu, čiastočne rozvinutého, medzi natívnym a rozvinutým stavom.