Produkty

Táto štúdia popisuje jednoduchú a účinnú metódu využívajúcu vysokoúčinnú kvapalinovú chromatografiu (HPLC) spojenú s fluorescenčnou detekciou na stanovenie kinetických parametrov vychytávania glutamátu v nervovom tkanive.Tkanivo sietnice získané od 7-dňových kurčiat sa inkubovalo so známymi koncentráciami glutamátu (50-2000 uM) počas 10 minút a merali sa hladiny neurotransmiteru derivatizovaného o-ftaldehydom (OPA) v inkubačnom médiu.Posúdením rozdielu medzi počiatočnou a konečnou koncentráciou glutamátu v médiu sa charakterizoval mechanizmus saturovateľnej absorpcie (K(m)=8,2 a V(max)=9,8 nmol/mg proteínu/min.).Toto opatrenie bolo do značnej miery závislé od sodíka a teploty, čo silne podporovalo, že mechanizmus znižovania koncentrácie je skutočne prijímaný vysokoafinitnými transportérmi.Okrem toho naše výsledky tiež preukázali, že chlorid zinočnatý (inhibítor transportérov glutamátu / aspartátu) vyvolal zníženie absorpcie glutamátu závislé od koncentrácie, čo dokazuje špecifickosť našej metodológie.Celkovo táto práca charakterizuje alternatívnu metodológiu na vyhodnotenie príjmu glutamátu v nervovom tkanive pomocou HPLC.Tento prístup by mohol byť dôležitým nástrojom pre štúdie spojené s charakterizáciou drobných zmien v transporte glutamátu súvisiacich s poškodením centrálneho nervového systému.