L-Proline Cas: 147-85-3 99% Biely prášok
Katalógové číslo | XD90293 |
Meno Produktu | L-prolín |
CAS | 147-85-3 |
Molekulový vzorec | C5H9N02 |
Molekulová hmotnosť | 115,13046 |
Podrobnosti o úložisku | Okolité |
Harmonizovaný colný kódex | 29339980 |
Špecifikácia produktu
Skúška | 99 % min |
Vzhľad | Biely prášok |
Špecifická rotácia | -84,5 až -86 |
Ťažké kovy | <15 str./min |
AS | <1 ppm |
Ph | 5,9 - 6,9 |
SO4 | <0,050 % |
Fe | <30 str./min |
Strata sušením | <0,3 % |
Zvyšok po zapálení | <0,10 % |
NH4 | <0,02 % |
Cl | <0,050 % |
Stav riešenia | > 98 % |
Pochopenie metabolizmu mikrobiálneho hostiteľa je nevyhnutné pre vývoj a optimalizáciu biokatalytických procesov založených na celých bunkách, pretože určuje efektivitu výroby.To platí najmä pre redoxnú biokatalýzu, kde sa používajú metabolicky aktívne bunky kvôli regeneračnej kapacite kofaktora/kosubstrátu endogénnej v hostiteľovi.Rekombinantná Escherichia coli bola použitá na nadprodukciu prolín-4-hydroxylázy (P4H), dioxygenázy katalyzujúcej hydroxyláciu voľného L-prolínu na trans-4-hydroxy-L-prolín s a-ketoglutarátom (a-KG) ako kosubstrátom.V tomto celobunkovom biokatalyzátore poskytuje centrálny metabolizmus uhlíka požadovaný kosubstrát a-KG, ktorý spája biokatalytický výkon P4H priamo s metabolizmom uhlíka a metabolickou aktivitou.Aplikovaním nástrojov experimentálnej a výpočtovej biológie, ako je metabolické inžinierstvo a analýza (13)C-metabolického toku ((13)C-MFA), sme skúmali a kvantitatívne opísali fyziologickú, metabolickú a bioenergetickú odozvu biokatalyzátora celej bunky. k cielenej biokonverzii a identifikovali možné metabolické prekážky pre ďalšie inžinierstvo racionálnej dráhy. Kmeň E. coli s deficitom degradácie prolínu bol skonštruovaný deléciou génu putA kódujúceho prolíndehydrogenázu.Celobunkové biotransformácie s týmto mutantným kmeňom viedli nielen ku kvantitatívnej hydroxylácii prolínu, ale aj k zdvojnásobeniu špecifickej rýchlosti tvorby trans-4-L-hydroxyprolínu (hyp) v porovnaní s divokým typom.Analýza toku uhlíka prostredníctvom centrálneho metabolizmu mutantného kmeňa odhalila, že zvýšený dopyt a-KG na aktivitu P4H nezvýšil tok generujúci a-KG, čo naznačuje prísne regulovanú operáciu cyklu TCA za študovaných podmienok.V kmeňoch divokého typu spôsobila syntéza a katalýza P4H zníženie výťažku biomasy.Je zaujímavé, že kmeň AputA dodatočne kompenzoval súvisiace straty ATP a NADH znížením energetických nárokov na údržbu pri porovnateľne nízkych rýchlostiach absorpcie glukózy namiesto zvýšenia aktivity TCA. Zistilo sa, že knockout putA v rekombinantnej E. coli BL21(DE3)(pLysS) byť sľubné pre produktívnu P4H katalýzu nielen z hľadiska výťažku biotransformácie, ale aj pokiaľ ide o rýchlosť biotransformácie a absorpcie prolínu a výťažok hyp na zdroji energie.Výsledky naznačujú, že po vyradení putA sa spojenie TCA-cyklu s hydroxyláciou prolínu cez kosubstrát a-KG stáva kľúčovým faktorom obmedzujúcim a cieľom ďalšieho zlepšenia účinnosti biotransformácií závislých od a-KG.