Produkty

Vyvinuli sme nový systém dodávania malej interferujúcej RNA (siRNA) s použitím ternárneho komplexu s polyetylénimínom (PEI) a kyselinou y-polyglutámovou (y-PGA), ktorý vykazoval tlmiaci účinok a žiadnu cytotoxicitu.Binárne komplexy siRNA s PEI mali veľkosť častíc približne 73-102 nm a 45-52 mV z-potenciál.Utlmujúci účinok komplexov siRNA/PEI sa zvýšil so zvýšením PEI a komplexy siRNA/PEI s pomerom náboja vyšším ako 16 vykazovali významné zníženie luciferázy v bunkovej línii myšieho karcinómu hrubého čreva pravidelne exprimujúcej luciferázu (bunky Colon26/Luc).V komplexe siRNA/Lipofectamine a komplexe siRNA/PEI16 sa však pozorovala silná cytotoxicita a aglutinácia krvi.Opätovné nabíjanie katiónových komplexov aniónovou zlúčeninou sa uvádza ako sľubná metóda na prekonanie týchto toxicít.Preto sme pripravili ternárne komplexy siRNA s PEI (pomer náboja 16) pridaním y-PGA na zníženie cytotoxicity a dodanie siRNA.Ako sa očakávalo, cytotoxicita ternárnych komplexov sa znížila so zvýšením obsahu y-PGA, čo znížilo ζ-potenciál komplexov.Silný tlmiaci účinok porovnateľný s komplexom siRNA/Lipofektamín bol objavený v ternárnych komplexoch vrátane y-PGA s aniónovým povrchovým nábojom.Vysoká inkorporácia ternárnych komplexov do buniek Colon26/Luc bola potvrdená fluorescenčnou mikroskopiou.Po dosiahnutí knockdown exogénne transfekovaného génu bola v bunkách B16-F10 hodnotená schopnosť komplexu sprostredkovať knockdown endogénneho prevádzkového génu, glyceraldehyd-3-fosfátdehydrogenázy (GAPDH).Ternárny komplex (komplex siRNA/PEI16/y-PGA12) vykazoval významný knockdown efekt GAPDH.Preto sme vyvinuli užitočný systém na dodávanie siRNA.